人胃癌細(xì)胞帶熒光素酶；MKN-45/LUC

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)，不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用！

商品詳情：

細(xì)胞別稱(chēng)；MKN-45-LUC；人胃癌細(xì)胞株-熒光素酶標(biāo)記；人胃癌細(xì)胞-LUC

種屬來(lái)源；人

組織來(lái)源；胃

生長(zhǎng)特性；貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

背景介紹；Luciferase MKN-45細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢火蟲(chóng)熒光素酶。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時(shí)不需要添加抗生素維持?？捎米魑灮鹣x(chóng)熒光素酶活性檢測(cè)中的陽(yáng)性對(duì)照，也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶Luc基因。MKN-45細(xì)胞是由S&middotAkiyama建立，源于一位35歲患有印戒細(xì)胞癌的女性的胃淋巴結(jié)。

物安全等級(jí)；1

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

蛋白酶激活受體4(PAR4)重組蛋白 Recombinant Protease Activated Receptor 4 (PAR4)

FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GREM1重組小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

TNFRSF10D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CFL1重組人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD83重組小鼠 CD83 / HB15 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

A Beta1-40 (mutation type, MT 0.1mgA Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突變型β淀粉樣肽1-40

ABHD14B重組人 ABHD14B 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IFNG Protein Rat 重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白

小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒

Tacrolimus (FK506) ELISA Kit 人(FK506)檢測(cè)試劑盒

HumanHerpessimplexvirus,HSV-Ag1ELISAKit 人單皰疹病毒抗原-1(HSV-Ag1)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumanArgyrophilicnucleolarorganizerregionproteins,Ag-NORs檢測(cè)試劑盒人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)檢測(cè)試劑盒

植物源性食品芥麥(Buckwheat)試劑盒20次

Humahymusactivatioegulatedchemokine,TARCELISAKit人活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)檢測(cè)試劑盒

人胃癌細(xì)胞帶熒光素酶；MKN-45/LUC五羥色胺 (Serotonin/5-HT)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

分泌型白細(xì)胞蛋白酶抑制物 (SLPI)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

P 物質(zhì) (Substance P)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

生存素 (survivin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(BACE1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： BACE1 ELISA Kit

Mouse esogen (E) ELISA Kit 小鼠雌激素(E)檢測(cè)試劑盒

ELISA 小鼠神經(jīng)肽Y(mouse NPY)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-13ELISAKIT大鼠白介素13

通用型馬鈴薯YN病毒(PotatoVirusYN;PVYN)試劑盒20次

ELISAKitANG-2大鼠血管生成素2