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豬孕激素/孕酮(PROG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
豬孕激素/孕酮(PROG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存保證產品質量,*,質量可靠,靈敏度高,效果穩(wěn)定。等優(yōu)點已經得到廣大客戶的認可,您可放心,且我司有專門的售后部門對您進行全線跟蹤。
產品名稱:豬孕激素/孕酮(PROG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存
英文名稱: PROG ELISA kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。
豬孕激素/孕酮(PROG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
豬孕激素/孕酮(PROG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
VEGFA 重組人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF65 蛋白 dm4CTP, 0 mM Solution
EPHB2 重組人 EphB2 / Hek5 蛋白 (aa 570-987, His & GST 標簽) dm5CTP, 0 mM Solution
VTCN 重組人 B7-H4 / B7S / B7x 蛋白 (Fc 標簽) ATP, 00 mM Solution
EPHB4 重組人 EphB4 / HTK 蛋白 (aa 563-987, His & GST 標簽) CTP, 00 mM Solution
ING5 重組人 ING5 蛋白 (GST 標簽) GTP, 00 mM Solution
BLOCS2 重組人 BLOCS2 / BLOS2 蛋白 (GST 標簽) UTP, 00 mM Solution
HMGN3 重組人 HMGN3 蛋白 (His 標簽) NTP Set, 00 mM Solutions
ABHD4B 重組人 ABHD4B 蛋白 (His 標簽) dm6ATP, 0 mM Solution
PDEC 重組人 PDEC 蛋白 (His & GST 標簽) TurboFect Transfection Reagent
SCN3B 重組人 SCN3B 蛋白 (His 標簽) TurboFect in vivo Transfection Reagent
CANT 重組人 CANT 蛋白 (Fc 標簽) Glycogen, RNA grade
USP46 重組人 / 小鼠 USP46 蛋白 (SUMO 標簽) Glycogen, molecular biology grade0922-5 96 孔板病毒 RNAout( 離心法 ) 5次
尿苷 5g
96 孔板病毒 DNAout( 真空法 ) 次
DiIC2(3) 高氯酸化物 00mg
ROX 參考染料 II 00μL
22-0290-20 ER-Tracker Red( 內質網紅色熒光探針 ) 20μL
6090-250 非凍型血液 DNA 保存液 250mL
葡聚糖凝膠 LH-20 25g
豬孕激素/孕酮(PROG)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒保存苯甲基磺 g
Wortmannin(PI3K 抑制劑 ) 0.5mg
微球菌核酸酶 5000U
2089-200 大鼠胰島細胞分離液 .063 200mL
6070-30 土壤 DNAout 30 次
Rosetta(DE3) 菌種 mL
超氧化物試劑盒 00 次
硅膠膜離心吸附柱再生液 500 次