產(chǎn)品展示
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產(chǎn)品名稱 | 人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物圖片 |
英文名稱 | Human Lung: Normal Vein Smooth Muscle Cells Derivatives |
價格 | 來電可享受優(yōu)惠 |
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產(chǎn)品描述:
人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物【Human Lung: Normal Vein Smooth Muscle Cells Derivatives】
人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物圖片人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物是從人原代肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取的,人原代肺大靜脈平滑肌細(xì)胞從正常人肺大靜脈平滑肌組織制備。正常人肺大靜脈平滑肌組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB 和 HIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。
總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。 cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA*鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應(yīng)0min 后終止RT反應(yīng)。利用x RT Buffer 運輸cDNA, μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。 蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。 潛在的應(yīng)用: <>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。
技術(shù)傳授:
凍存培養(yǎng)基
人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物圖片凍存細(xì)胞時必須使用的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
)細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型*凍存培養(yǎng)基,其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化,可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。
2)凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基,含0% DMSO,適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案,必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。
.配制凍存培養(yǎng)基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。
2.凍存貼壁細(xì)胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。
3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用 Countess®自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度,計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約00-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至0分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細(xì)胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀,將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。
6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞,使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞,使溫度每分鐘大約降低 °C?;蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
以下是人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物圖片的相關(guān)產(chǎn)品:
LRRC3B 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB 50 µg
Biotinidase / biotinase / BTD 抗體, 兔單抗 ELISA IHC-P 50 µg
Interleukin-3 receptor A / IL3RA 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
ERN / IRE 抗體, 兔單抗 ELISA 50 µg
CNTF / Ciliary Neurotrophic Factor 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
ACY / Aminoacylase- 抗體, 鼠單抗 ELISA WB 50 µg
VEGF-D / VEGFD / FIGF 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 ELISA 50 µg
Cyclin A / CCNA 抗體 (PE), 鼠單抗 FCM 25 Test
CD74 / DHLAG / p33 抗體, 兔多抗 ELISA 400 µg
人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物圖片4-羥-6-喹唑啉分子式:272.04英文名稱:4- hydroxyl group -6-:6064-08-7分子量: C8H5IN2O
2-氯-4,6-二甲吡分子式:66.6英文名稱:2- chloride -4,6- two:4237-7-9分子量: C8H7ClN2
,3-雙(4-氧)分子式:292.33英文名稱:,3- bis (4-) benzene:2479-46-分子量: C8H6N2O2
3-異喹啉分子式:44.7英文名稱:3- amino group:25475-67-6分子量: C9H8N2
2--6-(三氟甲)并噻唑分子式:28.2英文名稱:2- -6- (three amino methyl fluoride) benzothiazole:777-2-8分子量: C8H5F3N2S
磷酸二氫鉀分子式:36.09英文名稱:Potassium dihydrogen phosphate:7778-77-0分子量: KH2PO4
3-氟-2-羥吡分子式:3.09英文名稱:3- -2- hydroxy pyridine:74669-74-0分子量: C5H4FNO
2,6-二氟三氟分子式:82.09英文名稱:2,6- two f three f:分子量: C7H3F5
,3-二氟-5-分子式:239.99英文名稱:,3- two -5- fluoride iodobenzene:2265-9-0分子量: C6H3F2I
六氟磷酸四乙銅分子式:372.72英文名稱:六氟磷酸四乙銅:64443-05-6分子量: C8H2CuF6N4P
細(xì)胞可重發(fā)跟不可重發(fā):
可以重發(fā)的情況有哪些?
()細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物圖片出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
()客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
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