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產(chǎn)品描述：
小鼠胎兒真皮組織提取物【Embryo: Normal Mouse Fetal Dermal Derivatives】
     小鼠胎兒真皮組織提取物說明書真皮組織位于表皮深層，向下與皮下組織相連，與后者無明顯界限。真皮由致密結(jié)締組織組成。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠胎兒真皮組織中高質(zhì)量的總RNA，PCR準(zhǔn)備的*條cDNA鏈，蛋白質(zhì)及其亞組分。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。        cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA*鏈，以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄，體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及0mg總RNA。68℃反應(yīng)0min 后終止RT反應(yīng)。利用x RT Buffer 運輸cDNA， μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。        蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 50mM NaCl, mM EDTA, mM EGTA, % NP-40 , mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人血管組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, % SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。        潛在的應(yīng)用： <>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標(biāo)測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué)；<6>芯片研究與表達圖譜。
技術(shù)傳授:
凍存培養(yǎng)基
小鼠胎兒真皮組織提取物說明書凍存細胞時必須使用的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復(fù)蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含0% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數(shù)器、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用 Countess®自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約00-200×g的離心力將細胞懸液離心5至0分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  °C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 
以下是小鼠胎兒真皮組織提取物說明書的相關(guān)產(chǎn)品：

兔抗MMP20多克隆抗體 英文名：Anti-MMP20 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗CAB39多克隆抗體 英文名：Anti-CAB39 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗MOBA多克隆抗體 英文名：Anti-MOBA rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗MGLL多克隆抗體 英文名：Anti-MGLL rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗MREA多克隆抗體 英文名：Anti-MREA rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗MRGPRX多克隆抗體 英文名：Anti-MRGPRX rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗POMC多克隆抗體 英文名：Anti-POMC rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗STK26多克隆抗體 英文名：Anti-MST4 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗MT-N多克隆抗體 英文名：Anti-MT-N rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗MT-N6多克隆抗體 英文名：Anti-MT-N6 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗MT-N3多克隆抗體 英文名：Anti-MT-N3 rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

兔抗MTSS多克隆抗體 英文名：Anti-MTSS rabbit polyclonal antiboy 冷凍（-20℃） 避光

小鼠胎兒真皮組織提取物說明書Tween-80 吐溫-80 500ml  瓶

Guaiacol 愈創(chuàng)木酚 32994  20mg

Ni Sepharose H.P. 鎳-瓊脂糖凝膠 H.P. 25mL  瓶

(-)-Epigallocatechin gallate-EGCG 表沒食子兒茶素沒食子酸酯 989-5-5  20mg

一次性針頭式濾器 (250個/盒) 0.45um  個

Trichloroacetic acid,minimum 99.0% titration 三乙酸 00g  瓶

Maltotriose 麥芽三糖 g  瓶

真菌基因組DNA提取試劑盒 50T  盒

5ml凍存盒 36孔  個

Solar Fluor 750（效果同Alexa Fluor 750） 5 mg  支

小鼠IgG-ECL顯色試劑盒 kit  盒

細胞可重發(fā)跟不可重發(fā)：
可以重發(fā)的情況有哪些？
（）細胞運輸途中遭遇的各種問題，細胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；
（2）凍存的細胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；
（3）存活的細胞靜置24小時后，絕大多數(shù)細胞未存活，重發(fā)；
（4）凍存的細胞復(fù)蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；
（5）視具體情況而定。
小鼠胎兒真皮組織提取物說明書出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些？
（）客戶造成細胞污染，不重發(fā)；
（2）客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；
（3）細胞狀態(tài)不好，未細胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；
（4）細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；
（5）細胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；