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HT-29 (人結(jié)腸癌細(xì)胞)
本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用!
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品詳情:
別稱 HT 29; HT29
種屬 人類
年齡(性別) 女性,44歲
組織來源 結(jié)直腸腺癌
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
參考資料(來源文獻(xiàn))
HT-29細(xì)胞是由J·Fogh在1964年用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的;近來,已建株的培養(yǎng)細(xì)胞用含相同血清McCoy's5A培液培養(yǎng)。HT-29細(xì)胞在裸鼠中致瘤,也能在類固醇處理的地鼠中致瘤。HT-29細(xì)胞合成IgA、CEA、蛋白綁定TGF-β的分泌成分和粘液素等。 |
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 McCoy’s 5A+10% FBS+1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~36-60小時(shí)
凍存條件
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
致瘤性 Yes, in nude mice; forms well differentiated adenocarcinoma consistent with colonic primary (grade I); tumors also form in steroid treated hamsters.
受體表達(dá)情況 human adrenergic alpha2A, urokinase receptor (u-PAR), vitamin D (moderate expression), urokinase receptor (u-PAR); vitamin D (moderate expression), human adrenergic alpha2A
基因表達(dá)情況 secretory component of IgA; carcinoembryonic antigen (CEA); transforming growth factor beta binding protein; mucin, myc+; ras+; myb+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, Blood Type A; Rh+; HLA A1, A3, B12, B17, Cw5, HT-29 cells are negative for CD4, but there is cell surface expression of galactose ceramide (a possible alternative receptor for HIV).
細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中,加入約4 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min(視細(xì)胞消化情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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Porcine oxidized low density lipoprotein (OxLDL) ELISA Kit 豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)檢測試劑盒
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FSTL1 Protein Mouse 重組小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ORX-A(orexin-A 0.5mgORX-A(orexin-A) 增食欲素-A/欲激素A抗原
CCL23 Protein Human 重組人 CCL23 / MIP 3 蛋白
EGF重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 Protein
FSTL1 Protein Mouse 重組小鼠 FSTL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IFNG重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白 Protein
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異硫酸胍1公斤
Mousemonocytechemotacticprotein4,MCP-4ELISAKit小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T
血管內(nèi)皮生長因子受體2 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor receptor 2 規(guī)格: 英文縮寫: VEGF-R2
血管內(nèi)皮生長因子受體3 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor receptor 3 規(guī)格: 英文縮寫: VEGF-R3
血管活性腸肽 英文名稱: vasoactine inestinal peptide 規(guī)格: 英文縮寫: VIP
內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 英文名稱: Visfatin 規(guī)格: 英文縮寫: Visfatin
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) :
一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
四、貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
七、該細(xì)胞僅供科研使用。
八、備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代 。
九、 注意: 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。