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HMEC-1 (人微血管內(nèi)皮細(xì)胞)
| 型 號(hào)： | |
| 報(bào) 價(jià)： | 1 |
HMEC-1 (人微血管內(nèi)皮細(xì)胞)正在出售的產(chǎn)品：EFNB2 Protein Canine 重組狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人細(xì)胞裂解液 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C2 VERO C1008 (E6)非洲綠猴腎細(xì)胞
HMEC-1 (人微血管內(nèi)皮細(xì)胞)
商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
別稱 Hmec-1; HMEC1; CDC/EU.HMEC-1; Human Microvascular Endothelial Cell line-1
年齡（性別） 男；新生兒
組織來源 微血管內(nèi)皮
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
參考資料(來源文獻(xiàn))
Microvascular endothelial cells isolated from human foreskins were transfected with pSVT vector, a pBR-322 based plasmid containing the coding region for Simian virus 40A gene product, large T antigen. |
生物安全等級(jí) 2
生長培養(yǎng)基 Complete Growth Medium for HMEC-1
推薦傳代比例 1:3-1:5
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品：
豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISA 試劑盒
Neonatal rat thyroxine (NN-T4) ELISA Kit 大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)檢測試劑盒
Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 人生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCrosslaps,Cr檢測試劑盒人骨膠原交聯(lián)(Cr)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織DYRK1A激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
humanProstaglandinF，PG-FELISAKit人前列腺素F(PGF)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
HA重組甲型流感 H3N2 (A/California/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
PBEF (CT 0.5mgPBEF (CT) 內(nèi)脂素/B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子
EPHA7重組人 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein
CGREF1 Protein Human 重組人 CGREF1 蛋白
BSG Protein Human 重組人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PBEF (CT 0.5mgPBEF (CT) 內(nèi)脂素/B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子
CGREF1 Protein Human 重組人 CGREF1 蛋白
HA重組甲型流感 H3N2 (A/California/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
BSG Protein Human 重組人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
EPHA7重組人 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein
HMEC-1 (人微血管內(nèi)皮細(xì)胞)小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human thioredoxin (x) ELISA Kit 人硫氧化還原蛋白(x)檢測試劑盒
Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMRELISAKit 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickeumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3檢測試劑盒雞壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞AIL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseEsadiolreceptor,ERELISAKit小鼠雌二醇受體(ER)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠糖化白蛋白(GA)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠糖蛋白130(gp130)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
